脫毒甘薯的生產(chǎn)過程包括優(yōu)良品種篩選、莖尖苗培育、病毒檢測、優(yōu)良莖尖苗株系評選、高級脫毒試管苗速繁、原原種、原種和良種種薯及種苗的繁殖等8個環(huán)節(jié)每個環(huán)節(jié)都有嚴格的要求，更終目的是保證各級種薯的質(zhì)量，充分發(fā)揮脫毒甘薯的增產(chǎn)潛力。
一、優(yōu)良品種選用
甘薯優(yōu)良品種很多，而且經(jīng)過脫毒后都能不同程度地提高產(chǎn)量、改善品質(zhì)。但甘薯品種都有一定的區(qū)域適應(yīng)性和生產(chǎn)實用性，在進行甘薯脫毒時一定要根據(jù)本地區(qū)氣候、土壤和栽培條件，選用適合本地區(qū)大面積栽培的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)品種或具有特殊用途的品種。例如，在城郊地區(qū)更好選用龍九、北京553、徐薯34、心香、西農(nóng)431等食用型品種，甘薯"淀粉"加工區(qū)應(yīng)選用SL-19、鄂薯6、豫薯12、豫薯13,徐薯22號等淀粉用品種。另外，特別需要注意的是，甘薯脫毒后只能去除體內(nèi)某些或某種病毒，其品種本身的抗病毒、抗莖線蟲病、抗根腐病等病蟲害能力并沒有太大改變。選用品種時，一定要考慮到品種本身的抗病蟲特性。
二、莖尖苗培育
病毒主要通過維管輸導組織傳播，莖尖分生組織未形成維管束，病毒主要通過細胞間連絲擴散，傳播速度很慢。再者，莖尖分生組織新陳代謝活動十分旺盛，生長激素濃度較高，病毒的復制受到很大抑制，因此，莖尖頂部分生組織不帶或很少攜帶病毒。在無菌條件下切取甘薯莖尖分生組織，在特定的培養(yǎng)基上進行離體培養(yǎng)，就能夠再生出可能不帶有病毒的莖尖脫毒苗。誘導莖尖苗的方法：選甘薯苗莖頂部3厘米長的芽段，用70%酒精、3%漂白粉液分別消毒，在超凈工作臺內(nèi)解剖鏡下剝離莖尖。將剝離的長0.2-0.5毫米(一般帶1-2個葉原基)的莖尖接種在附加1-2毫克每升6-BA的MS培養(yǎng)基上，26-28攝氏度下光培養(yǎng)，莖尖膨大變綠后轉(zhuǎn)入無激素的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)成莖尖試管苗。待苗長至5-6片葉時移至營養(yǎng)缽內(nèi)進行病毒檢測。一般來講，從剝莖尖到誘導出5-7片葉的莖尖苗至少要用60-90天。利用分生組織培養(yǎng)誘導甘薯莖尖苗是甘薯脫毒的技術(shù)關(guān)鍵。
三、病毒檢測
莖尖分生組織培養(yǎng)得到的莖尖苗并不都是脫毒苗，只有部分苗不含病毒，是脫毒苗；莖尖苗必須經(jīng)過嚴格的病毒檢測確認不帶病毒后廠才是脫毒莖尖苗。莖尖苗的檢測十般首先采取目測法淘汰弱苗和顯癥苗，然后再用血清學方法或分子生物學方法進行篩選。經(jīng)血清學或分子生物學方法檢測呈陰性的樣品再進行指示植物嫁接檢測。
四、優(yōu)良株系評選
甘薯的芽變率比較高，莖尖分生組織培養(yǎng)再生的莖尖苗株系間在形態(tài)和產(chǎn)量方面往往存在較大差異。因此,經(jīng)病毒檢測確認的脫毒苗必須進行優(yōu)良株系評選，淘汰變異株系，保留優(yōu)良株系。株系評選的方法是：將脫毒苗株系每系5-10株栽種到防蟲網(wǎng)室內(nèi)，以同品種普通帶毒薯為對照，進行形態(tài)、長勢、產(chǎn)量等多方面的觀察評定，選出若干既符合品種特性又高產(chǎn)的更優(yōu)株系，混合繁殖。
五、高級脫毒試管苗速繁
利用莖尖分生組織培養(yǎng)獲得脫毒苗后，要獲得大田生產(chǎn)利用的足夠脫毒苗，快速繁殖技術(shù)起著決定性作用。脫毒甘薯莖尖苗的大量繁殖，可以采用試管苗單葉節(jié)快繁或溫網(wǎng)棚繁殖2種方式來完成。二者在速度、成本等方面互有優(yōu)勢。
1、 脫毒苗試管快繁
脫毒苗試管快繁具有以下優(yōu)越性：①繁殖速度快。在合適的培養(yǎng)條件下(溫度25~28攝氏度，每天光照16小時)，1個莖節(jié)45天內(nèi)即可長成具5-6片葉的小植株，以繼代1次增殖5株計算，其繁殖系數(shù)為5n。②避免病毒再侵染。脫毒苗的試管快繁是在嚴格的無菌條件下進行的，即沒有病毒源也沒有傳播媒介。③繼代繁殖成活率高。除極少數(shù)由于操作不慎造成試管苗污染外，單莖葉成苗率達100%。④不受季節(jié)、氣候和空間限制，可以進行工廠化生產(chǎn)。目前脫毒苗快繁方法為固體培養(yǎng)，莖尖苗試管快繁培養(yǎng)基：一般采用不加任何激素的1／2培養(yǎng)基。
試驗表明，全量MS培養(yǎng)基能夠給試管苗提供較充分的營養(yǎng)成分，從而能夠保持試管苗較旺盛的生長活是理想的培養(yǎng)基；但從試繁的角度看，在保證正常情況下，繁殖系數(shù)的高低主要取決于葉片數(shù)及株高2個指標，l／2MS培養(yǎng)基中試管苗的生長雖不及全量MS培養(yǎng)基中的旺盛，但上述2個指標仍能達到快繁的要求，也為較理想的培養(yǎng)基。
2、MS的配制及培養(yǎng)基的配制方法
MS的配制分為大量元素、中微量元素、有機物類和鐵元四種藥劑，其配方為：
大量元素MS1：20倍
元素 | 化學式 | 配量《mg》 | 2L用量(mg) | 硝酸銨 |
| 1650*20=33000 | 66000 | 硝酸鉀 |
| 1900*20=38000 | 76000 | 二水氯化鈣
無水氯化鈣 |
| 440*20=8800
332.25*20=6645 | 17600
13290 | 七水硫酸鎂 |
| 370*20=7400 | 14800 | 磷酸二氫鉀 |
| 170*20=3400 | 6800 |
定容1000ml 取量50ml/L
中量元素MS2：100倍
元素 | 化學式 | 配量《mg》 | 備注 | 硼酸 |
| 6.2*100=620 |
| 四水硫酸錳 |
| 22.3*100=2230 |
| 七水硫酸鋅 |
| 8.6*100=860 |
| 二水鉬酸鈉 |
| 0.25*100=25 |
| 碘化鉀 | KI | 0.83*100=83 |
| 氯化鈷 | CoCL2.6H2O | 0.025 | 由于用量小不好稱重，故擴大1000倍稱重，定容500ML，含量0.05mg/ml,取50ML | 硫酸銅 | CuSO4.5H2O | 0.025 |
定容1000ml 取10ml/l
MS3 100倍
| 元素 | 化學式 | 配量《mg》 | | 七水硫酸鐵 | FeSO4.7H2O | 27.8*100=2780 | | 乙二胺四乙酸二鈉 | EDTA | 37.3*100=3730 |
定容1000ML 取10ml/L (定容后需加熱至沸騰)
MS4 100倍
| 元素 | 化學式 | 配量《mg》 | | B1 |
| 0.4*100=40 | | B6 |
| 0.5*100=50 | | 煙酸 |
| 0.5*100=50 | | 甘氨酸 |
| 2.0*100=200 |
定容1000ml 取10ml/L
將配好的MS定容后裝入玻璃容量瓶中放冰箱中存放，待用。
培養(yǎng)基配制步驟：(配制1L)
1、取各ms混合+30g白砂糖溶解
2、調(diào)PH至5.8,偏堿用HCl,偏酸用NaoH.(1摩爾鹽酸：100ml蒸餾水加8.6mlHCL；1摩爾氫氧化鈉：100ml蒸餾水加4gNaOH)。
3、將加水約500ml的不銹鋼鍋加熱至沸后，加6g瓊脂粉的水溶液，不斷攪拌至沸騰。
4、將PH值調(diào)好的ms+白砂糖的溶液加入煮沸的瓊脂溶液中，停止加熱，加水定容1L，并不斷的攪拌至培養(yǎng)基均勻。
5、用液體分裝器分裝到培養(yǎng)瓶中，約50-60ml/瓶。后將無菌封口膜用橡皮筋封好。
6、把封好有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶加入高溫滅菌箱中滅菌。（121攝氏度，滅菌20min）
7、在通過滅菌的培養(yǎng)基上進行無菌甘薯苗的切段（每瓶接種3個莖段）、接種的快繁工作。
3、試管苗快繁的環(huán)境
試管苗快繁的光照條件：光照時間長短對甘薯試管苗發(fā)育的意義，不僅在于莖葉形態(tài)發(fā)育的需要，而且對其生長也有顯著影響。在暗培養(yǎng)條件下，甘薯脫毒苗節(jié)段有葉的分化及莖的伸長，但呈黃化狀態(tài)，葉片不伸展或生長，莖細弱。甘薯脫毒試管苗的株高、葉片數(shù)及鮮重隨光照時數(shù)的延長而提高，延長光照時數(shù)對試管苗莖葉的分化及生長均為有利，較長的光照有利于提高試管苗繁殖系數(shù)，獲得健壯的脫毒試管苗。另外，在不同的光照時數(shù)下，甘薯脫毒試管苗的平均節(jié)間長度差異不顯著，因為試管苗切段為單葉節(jié)快繁，節(jié)間無須過長，在一定的節(jié)間長度下，葉片數(shù)增加，則繁殖系數(shù)呈幾何級數(shù)數(shù)增加。延長光照時數(shù)，伴隨株高的增加，只增加葉片數(shù)而不顯著增加節(jié)間長度，正適合于試管苗單葉節(jié)快繁的需要。目前在組培室中一般采用光照強度2000-3600lux,光照16h.
溫濕條件：據(jù)研究，甘薯試管苗在25-28攝氏度生長做快，空氣濕度保持在75%即可。
將接種好的試管瓶移置于以上環(huán)境的組培室進行培養(yǎng)45-60天，待脫毒苗5-6片葉，即可再次進行在試管瓶的擴繁，或移栽至蛭石營養(yǎng)盤馴化。試管苗在蛭石營養(yǎng)盤中的馴化方法為：首先將試管瓶上的無菌封膜去掉煉苗2-3天，再進行移栽，可以提高試管苗的成活率，移栽時將試管苗的根部剪掉，移栽至含水合適的（手握蛭石成團）蛭石盤中，株行距為5*5cm。在光照3600lux，溫度25-30攝氏度，空氣濕度在75%的環(huán)境下培養(yǎng)10天左右，待外界環(huán)境合適時，移栽至防蟲網(wǎng)棚進行擴繁，若外界環(huán)境不適合，還可在組培室中進行蛭石的擴繁。
4、高級脫毒苗田間快繁
①防蚜塑料大棚速繁。在3月中旬將5-7片葉的脫毒試管苗打開瓶口，室溫下加光照煉苗5-7天。栽前頭天下午在棚內(nèi)苗圃上撤上用100克40%樂果乳油加水2.5-5千克稀釋后與15-25千克干餌料拌成的毒餌，以消滅地下害蟲。然后按5厘米X5厘米株距栽種在覆蓋防蟲網(wǎng)的塑料大棚內(nèi)，澆足水后加蓋一層小弓棚，把溫度控制在25攝氏度左右。待苗長至15-20厘米時剪下蔓頭繼續(xù)栽種、快繁。采用這種雙膜育苗方法繁殖系數(shù)可以達到100倍以上。但要注意小水勤澆，通風透氣，保證溫度既不能低于10攝氏度，也不能高于30攝氏度。②防蚜網(wǎng)棚速繁。即在4月下旬或5月初將經(jīng)過鍛煉的5-7片葉的脫毒試管苗，按每畝10 000株的密度栽種在防蚜蟲大棚內(nèi)，勤施肥水，待苗長至15厘米左右時摘心，促進分枝。以后待分枝苗長至5片葉時繼續(xù)剪苗栽種速繁，或直接用于繁殖原原種。 ③防蚜冬暖大棚越冬快繁。9月底10月初將脫毒試管苗移栽在外加40目防蟲網(wǎng)的冬暖式大棚內(nèi)。11月上旬蓋塑料膜，12月上、中旬加蓋草簾子，使棚內(nèi)溫度保持在10-30攝氏度。注意及時防治蚜蟲。到4月中、下旬采苗移至苗圃進射擴繁。這種方法脫毒苗在外暴露時間過長，重新感染病毒的機會較大，一般用的較少。 需要特別強制的是，甘薯病毒主要靠桃蚜(Myzuspersicae)、棉蚜(Aphisgossipii)和蘿卜蚜(Lipaphis erysimi)以非持久方式進行傳播。因此，無論采用何種速繁方法，都要切記采取隔離措施(40目防蚜網(wǎng)、500米以內(nèi)無普通帶毒甘薯空間隔離等)和定期噴灑防治蚜蟲的藥劑來防止蚜蟲傳毒再侵染。
六、原原種繁育
用高級脫毒試管苗在防蚜蟲網(wǎng)棚內(nèi)無病原土壤上生產(chǎn)的種薯即原原種。脫毒甘薯原原種的繁育要求非常嚴格：必須具備3個條件：第一，栽種的必須是高級脫毒試管苗。第二；必須要在防蟲網(wǎng)棚內(nèi)生產(chǎn)原原種。防蟲網(wǎng)棚是繁育原原種的重要條件之一，而且所用防蟲網(wǎng)的網(wǎng)眼必須在40目以上，這樣蚜蟲就不能通過；可以大大減少蚜蟲傳播病毒的機會。第三，所用地塊必須是無病原土壤，更好選用多年未栽種過甘薯的土壤。另外，還要經(jīng)常噴灑殺蟲藥劑，防治蚜蟲，以免產(chǎn)生病毒再侵染。這3個條件是繁殖原原種所必須具備的。使用原原種苗甚至原種苗栽種在防蟲網(wǎng)棚內(nèi)所生產(chǎn)的種薯，嚴格講不能算是原原種。
原原種繁殖在防蟲網(wǎng)棚內(nèi)進行網(wǎng)棚內(nèi)光照較弱，通風透氣性較差，很容易造成旺長。因此，繁殖原原種時，栽插密度不易太高，一般以每畝4000株為宜。在管理方面應(yīng)注意少施氮肥，多施磷、鉀肥，注意控溫、控水、控濕，既要防止莖葉徒長，又要促進多結(jié)薯塊。如果脫毒甘薯長勢偏旺，可采用提蔓方法或每666.7平方米用0.2千克磷酸二鉀對水50千克，葉面噴施2-3遍，促使薯塊膨大和地上部穩(wěn)長。如果發(fā)生了徒長，秧蔓深達40厘米以上，則可以使用打群頂或用75-150克多效唑?qū)λ?0-70千克葉面噴灑1-2次的辦法加以控制。
在繁殖原原種時，要始終貫穿防止病毒再侵染的意識。在網(wǎng)棚內(nèi)要種植一些指示植物，每1-2個星期噴灑1次防治蚜蟲的藥劑。防治蚜蟲的辦法有：1.5%樂果粉劑，按每畝1.5-2.5千克用量噴粉；49%樂果乳油1000-2000倍液，每畝50千克；50%敵敵畏1 500倍，每畝50千克；50%抗蚜威可濕性粉劑4000倍液，每畝50千克；20%殺滅菌酯或2.5%溴氰菌酯20毫升對水50千克噴霧；50%久效磷乳油2000-3000倍，每畝50千克。防蚜蟲時更好多種藥劑輪換使用，以免蚜蟲產(chǎn)生抗藥性，達不到防治效果。 原原種收獲時要逐株觀察是否有病毒癥狀，一旦發(fā)現(xiàn)病株要堅決拔除，以確保原原種質(zhì)量。如果網(wǎng)棚內(nèi)所種植的指示植物表現(xiàn)病毒癥狀，整個棚內(nèi)所繁殖的種薯應(yīng)降級使用。
七、原種繁育
用原原種苗(即原原種種薯育出的薯苗)在500米以上空間隔離條件下生產(chǎn)的薯塊為原種。原種的繁殖必須用薯苗為原原種苗：必須具有500米內(nèi)無普通帶毒甘薯種植的空間隔離條件；必須所用田塊至少3年以上沒種過普通帶毒甘且為無病田。一般來講，原原種的數(shù)量比較少，而且價格比較貴。繁育原種時更好盡早育苗，以苗繁苗，以擴大繁殖面積，降低生產(chǎn)成本。原原種苗快繁的方法有很多種，但以加溫育苗法、采苗圃育苗法和單、雙葉節(jié)繁殖法更為常用。
①加溫育苗法，又稱多級育苗法。在冬季或早春(2月上旬)利用火炕、電熱溫床、雙層塑料薄膜覆蓋溫床或加溫塑料大棚等提早排種，加強管理，促進薯苗早發(fā)快長。將原原種種薯消毒處理后排入苗床，排種時注意薯塊頂端向上，薯面處于同一平面，種薯薯塊平放。撤好串縫土、澆足床水后覆土蓋塑料薄膜。在育苗的頭一周內(nèi)，溫床溫度更好在37攝氏度左右，以后逐漸降至30-32攝氏度。千萬注意：如果排種到萌芽之間土壤溫度低于10攝氏度，即便時間只持續(xù)1天，也會造成凍害，導致薯塊腐爛，影響出苗。出苗后應(yīng)注意及時揭膜，避免燒苗。當薯苗長至12-18厘米、5-7片葉時剪苗，栽到另外的火炕或溫床內(nèi)成苗，再把先后兩級苗床的苗剪栽到覆蓋薄膜的冷床或大棚里繼續(xù)繁殖。待4月份氣溫上升至10攝氏度以上后再剪栽到采苗圃里育苗。
?、诓擅缙杂绶?。"朝陽溝"采苗圃：栽種行距40厘米，株距10厘米，定植密度為666.7平方米16000-20000株。采苗周東西向開溝，薯苗緊貼溝的北面栽種，苗尖不超過壟背。這種方法背風向陽溫度高，有利于發(fā)根長苗。小壟密植采苗圃：壟距50厘米，株距10厘米，定植密度13000株／666.7平方米。平畦采苗圃：做成1米寬小畦，澆足底墑，蓋好地膜。按15厘米X15厘米株行距插苗。定植密度666.7平方米30 000株左右。為促進薯苗生長，可以分次追施氮肥，適當澆水。但采苗前幾天應(yīng)停止?jié)菜?，促進薯苗健壯生長，提高栽苗成活率。
③單、雙葉節(jié)繁殖法。把7-8個節(jié)的薯苗剪短成1葉1節(jié)或2葉2節(jié)的短苗栽種到采苗圃里，長成5-7片葉的成苗時栽到原種繁殖田里。若用單葉節(jié)繁殖，每節(jié)上端要留短一些(不超過0.5厘米)，下端留長些。更好上午剪苗下栽苗，栽后澆足窩水，第二天早晨再澆1次，蓋上一層土。繁殖期間應(yīng)加強田間管理，管理要細致，肥水應(yīng)及時，以便促使幼芽早出土。除采用500米以內(nèi)無普通帶毒甘薯種植的空間隔離辦法防止蚜蟲傳毒再侵染外，原種繁殖的其他生產(chǎn)條件和環(huán)境與普通甘薯生產(chǎn)基本相同。因此，原種繁殖田的栽培管理同普通甘薯基本一樣。但繁殖原種時栽插期不易過早，更好在6月下旬以后栽種。另外，脫毒甘薯莖葉生長比較旺盛，要注意控水控肥，防止旺長。原種繁殖時要密切注意防止病毒再侵染。繁殖田周圍500米內(nèi)不能有普通帶毒甘薯種植，所用田塊必須3年以上未種過普通帶毒甘薯，且無莖線蟲病、根腐病、黑斑病等。要在繁殖田內(nèi)種植一些指示植物，每15天定期噴灑防蚜蟲藥劑。收獲前要觀察病毒發(fā)病情況，及時拔去病株。收獲時嚴把質(zhì)量關(guān)，不符合質(zhì)量要求的薯塊堅決不入窖。
原種和良種的繁育需要有500米的空間隔離帶(即500米內(nèi)無帶毒薯種植)和無病田塊，一般情況下，春季(4月上旬)引種1 000棵高級脫毒試管苗種采苗圃，到夏季(6月下旬)可利用防蟲網(wǎng)棚繁殖666.7平方米原原種，收獲原原種種薯1000-1500千克；第二年早春用原原種種薯育苗、速繁，在隔離條件下能繁殖100＊666.7平方米原種，收獲原種種薯100-200噸;第三年可繁殖5000＊666.7平方米良種；第四年可以供應(yīng)105＊666.7平方米以上大田生產(chǎn)用薯種。各地可以參考這一比例，再根據(jù)當?shù)馗适碛缗c生產(chǎn)的技術(shù)水平加以適當調(diào)整，以滿足當?shù)厣a(chǎn)對脫毒甘薯種薯的需要。
在脫毒甘薯的擴繁過程特別要注意防止病毒再侵染。具體措施有，加蓋40目防蟲棚、500米以上空間隔離、定期噴灑殺蚜蟲藥劑等。另外，繁育原原種和原種更好在3年以上未種過甘薯的生茬地，切匆在病(根腐病、線蟲病等)生產(chǎn)種薯。
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